Разделы сайта
Услуги
Все услуги
Лабораторная диагностика гриппа и острых и респираторных вирусных инфекций
 
24 Ноября 2016 г.

Лабораторная диагностика гриппа и острых и респираторных вирусных инфекций

НАПРАВЛЕНИЕ на ИФ и РТГА,ПЦР (грипп)

   Лабораторная диагностика гриппа и острых и респираторных вирусных инфекций (ОРВИ) проводится в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами  СП 3.1.2.3117-13 «Профилактика гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций».

Согласно приказу Управления Роспотребнадзора  по Республике Башкортостан и Министерства здравоохранения Республики Башкортостан №2208-Д/256 от 21.07.2016г.  ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Башкортостан»  на безвозмездной основе обеспечивает лабораторную диагностику гриппа, ОРВИ, выделение и идентификацию вирусов гриппа, изолированных от больных, доставленных из прикрепленных к опорной базе медицинских организаций используя  следующие методы:

- метод ПЦР - обнаружение РНК вирусов гриппа. Лабораторные исследования проводятся для людей с тяжелой клинической картиной, пневмонией.

- методом иммунофлюоресцентного анализа - выявление антигенов вируса гриппа и ОРВИ при исследовании мазков из носоглотки,

           - серологического метода (реакция торможения гемагглютинации - РТГА) диагностически значимое увеличение уровня (титра) специфических антител во второй сыворотке (по сравнению с первой) в 4 и более раз при одновременном исследовании в стандартных серологических тестах парных сывороток крови больного.

 

Материал  для исследования:

1. Методом иммунофлюоресцентного анализа (ИФ):

-биоматериал - мазки из носовой полости (цилиндрический эпителий, содержащий вирусные антигены) (отбор в первые три дня заболевания);

2.Серологического исследования (РТГА):

-является парные сыворотки крови пациента (первая порция крови из вены должна быть отобрана в начале заболевания (1-3 день). Вторая порция - в период реконвалесценции (на 10-12 день заболевания и позднее).

3. Для метода ПЦР  забирают 5 видов клинического материала:

-мазки из полости носа и ротоглотки

-смывы из полости носа и смывы из ротоглотки

-носоглоточное отделяемое

Отбор материала  для исследования вирусных антигенов.

Отбор клинических материалов должен проводиться обученным персоналом с применением средств индивидуальной защиты. 

Отбор  материала  проводится  в  соответствии  с  методическими  рекомендациями

N 0100/4434-06-34 «Быстрая диагностика гриппа и других ОРВИ иммунофлуоресцентным методом».

Методические рекомендации "Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа А (H1N1), у людей".

       Отбор, упаковка, хранение и транспортировка проб должна проводиться в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами СП 1.3.2322-08 "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней".

 

Процедура отбора материалов.  Практически во всех случаях достаточно только мазка из носа и /или парную сыворотку крови

1. Мазки из носовой полости (ИФ).

Если материал берется у маленьких детей, во избежание повреждения слизистой при резких движениях ребенка нужна помощь ассистента, который усаживает его к себе на колени, одной рукой прижимает руки ребенка, а другой рукой - голову. Детей старше 7 лет и взрослых больных усаживают в положение с приподнятым носом.

Пациент должен высморкаться. При обильном слизистом или слизисто-серозном отделяемом необходимо очистить полость носа сухим ватным тампоном. При обильных гнойных выделениях проводят наиболее тщательную очистку носовых ходов, без чего материал для исследования забирать не следует, поскольку обилие детрита и неспецифически светящихся лейкоцитов не позволит провести исследование.

Сухой тонкий тампон  вводят в нижний носовой ход как можно глубже (взрослым и школьникам - на глубину до 3 см, детям более младшего возраста - на 1,5-2 см). Вращательным движением с небольшим прижатием тампона к стенкам носа снимают со слизистой бокаловидный эпителий. Процедуру повторяют другим ватным тампоном со вторым носовым ходом.  Ватную часть тампона на 1,5-2 см. погружают в стерильную пробирку с забуференным  физиологическим раствором. Не допускается сухой тампон!

  Приготовление фосфатного солевого буферного раствора

1. 38,25 г натрия хлористого (NaCl) и 7,12 г натрия фосфорнокислого двузамещенного (Na2HPO4) последовательно растворяют в 4,5 л дистиллированной воды (раствор А).

2. 4,25 г натрия хлористого  (NaCl) и 1,36 г калия фосфорнокислого однозамещенного (КH2PO4) последовательно растворяют в 0,5 л  дистиллированной воды (раствор В).

3.   Добавляют раствор В к раствору А до получения рН 7,2-7,4.

4.    Раствор хранят при температуре  от 2 до 8 °C не более 1 недели.

Для метода ПЦР подходит как забуференный физиологический раствор, так и обычный физиологический раствор.

2.Мазки из ротоглотки (для ПЦР). 

Мазки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки после предварительного полоскания полости рта водой. После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл стерильного 0,9 % раствора натрия хлорида или раствора фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.

3. Смыв из полости носа (для ПЦР). 

Сбор материала производят в положении больного сидя с отклоненной назад головой. Для получения смыва из полости носа в оба носовых хода поочередно с помощью одноразового шприца вводят по 3-5 мл теплого стерильного 0,9 % раствора натрия хлорида. Промывную жидкость из обоих носовых ходов собирают через воронку в одну стерильную пробирку.

4.Смывы из ротоглотки (для ПЦР). 

Перед сбором материала необходимо предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 сек) 8-10 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через воронку в стерильную пробирку.

 

5. Носоглоточное отделяемое.

Производится натощак после взятия мазков из полости носа. Осуществляется двумя способами:

1. Больной в три приема прополаскивает горло 10-15 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Смыв собирают в одноразовые полипропиленовые флаконы с завинчивающимися крышками объемом 50 мл. Ватными тампонами, зажатыми пинцетом, протирают заднюю стенку глотки и носовые ходы. Ватные тампоны опускают во флакон со смывом.

2. Сухим или слегка увлажненным 0,9% раствором натрия хлорида тампоном, который удерживают с помощью пинцета, протирают заднюю стенку глотки и опускают его в пробирку с 5 мл стабилизирующей среды. Процедуру повторяют 2-3 раза. Все тампоны от одного больного собирают в одну пробирку. После взятия материала с задней стенки глотки тщательно протирают носовые ходы небольшими ватными тампонами и опускают их в ту же пробирку. Пробирку закрывают.                                                                                                                                                                                 

6. Кровь для серологических исследований (РТГА).

Кровь должна быть получена из локтевой вены в количестве 3-5 см3 в стерильную сухую пробирку. После отделения сыворотки проба должна быть помещена в чистую посуду (например, в пробирку Эппендорфа), герметично закрыта и сохраняться  до забора второй пробы крови при температуре (+4-+8С). Объем каждой пробы сыворотки должен быть не менее 1,5-2 мл. Транспортировка обеих проб должна осуществляться при температуре (+4-+8С). 

 

Транспортировка и хранение мазков.

Тампон со снятыми клетками немедленно погружают в пробирку с 2-3 мл 0,01 М фосфатного солевого буфера, рН 7,2-7,4. Тампоны как можно быстрее (не более чем за 2 часа) доставляют в лабораторию в охлажденном состоянии. Замораживание должно быть исключено.

Хранить пробирки с материалом более 2 ч не рекомендуется, так как при этом происходит разрушение эпителиальных клеток и выход вируса в среду, что снижает результативность иммунофлюоресцентного анализа.

Пробирки с тампонами должны быть дополнительно герметизированы скотчем или лейкопластырем для предотвращения разгерметизации и контаминации при транспортировке.

Маркировка проб и оформление сопроводительных документов

Каждая проба должна быть маркирована. Маркировка проб должна соответствовать сопроводительным документам. 






Поделиться:

Похожее

Исследование на вирусы гриппа методо...

Грипп – острое инфекционное заболевание дыхательных путей, вызываемое вирусам...
Подробнее

От сказки к реальности — Крекс - пек...



В рамках Проекта «Содействие повышению уровня финансовой грамо...
Подробнее

Горячая линия по вопросам такси и ка...

Уфа Центр консультирования и информирования граждан по вопросам защи...
Подробнее

Благотворительный спектакль 29 ноября

29 ноября в театре оперы и балета новый благотворительный спектакль, роли...
Подробнее

Задать вопрос

Клещи
  • Клещи
  • Исследования воздуха
  • Классы опасности отходов
  • Исследования воды
  • Личная медицинская книжка
  • Сертификация, декларирование
  • Рабочие места
  • Здания, строения, сооружения
  • Почва
  • Дезинфекционная деятельность
  • Консультационный центр по защите прав потребителей
  • Производственный контроль
  • Биоматериал от людей
  • Проекты СЗЗ, ЗСО, ПДВ и др.
  • Коронавирус (COVID-19)
Введите слово с картинки*:
CAPTCHA
X Сайт использует cookies с целью оптимального оформления и улучшения веб-сайта, а также предоставления определенных функций. Пользуясь веб-сайтом в дальнейшем, Вы также соглашаетесь на использование cookies. Дополнительная информация о cookies.